用液氮罐冻存不同的细胞会交叉感染吗，该如何避免

　　用液氮罐冻存不同的细胞是否会交叉感染是实验室细胞保存过程中需要特别注意的问题。由于液氮罐内温度极低，细胞样本在保存时常常需要被置于液氮罐中以保持其长期存活性和稳定性。然而，许多实验室的细胞冻存过程中往往将不同种类的细胞置于同一容器中，这可能导致细胞之间的交叉污染和交叉感染。是否会发生这种情况，取决于冻存细胞的种类、保存方式以及在冻存过程中采取的安全措施。针对这一问题，研究表明，正确的操作步骤和细胞管理方法能够有效防止交叉感染的发生。

　　液氮罐冻存过程中的交叉感染风险

　　细胞交叉感染通常是由不当操作或保存环境不洁净引起的。液氮罐中的温度通常维持在-196°C，理论上此时细胞内的活动几乎完全停止，感染病原也无法存活。然而，冻存细胞的交叉感染并非完全不可避免，关键因素在于操作过程中的污染源、容器密封性以及样品管理。

　　1. 污染源及操作环境的影响

　　液氮罐的使用环境不当是造成细胞交叉感染的一个重要因素。例如，如果液氮罐内含有未经彻底清洁的污物或外部污染物，细胞样本在冻存过程中可能接触到这些病原体。此外，如果冻存的细胞样本没有妥善封闭，或者存储的容器未能完全隔离不同种类的细胞，交叉感染的风险则显著增加。

　　细胞冻存的过程中，操作人员接触细胞时，如果手部、工具或容器上存在病原体，这些病原也可能被引入冻存系统。因此，保持无菌操作环境和使用合适的操作工具是防止细胞交叉感染的基础。

　　2. 液氮罐的容器密封性

　　液氮罐常见的储存方式是将样本置于密封良好的冻存管内，封闭的冻存管能够有效防止外界污染物进入。如果使用的冻存管或盒子存在微小裂缝，或在冷冻过程中因温度骤变而发生破裂，交叉感染的几率将大大增加。

　　液氮罐的密封性是非常关键的，尤其在不同类型的细胞样本存储时，不同细胞类型的冻存容器必须要进行严格的密封处理，避免细胞间的交叉污染。例如，研究人员推荐使用封闭式冻存管，并且在冻存管内填充的样本不应超过管子的最大容量，以防冷冻过程中的细胞间渗漏。

　　3. 避免交叉感染的有效措施

　　避免液氮罐冻存过程中发生交叉感染的有效方法包括以下几个方面：

　　- 单独存储不同种类的细胞： 对于实验室中存储的细胞样本，应尽可能将不同来源的细胞分开存储。这可以通过使用单独的冻存管或冻存盒来实现。如果不得不将多种细胞样本存储在同一个容器内，应确保每种细胞样本在容器中的封闭性和隔离性，避免不同细胞间的直接接触。

　　- 使用优质的冻存管和盒子： 选择高质量的冻存管和冻存盒是防止交叉感染的关键。冻存管的材质应具备良好的耐低温性能，并且管口应紧密封闭。研究表明，采用自封式冻存管和玻璃冻存瓶能够有效减少交叉感染的可能性。

　　- 冷冻操作中的无菌环境： 在冻存细胞的过程中，保持操作环境的无菌是非常重要的。所有参与冻存过程的器械，如移液器、冻存管、手套等，都应在使用前进行消毒或灭菌，避免因操作不当而引入外源性污染。实验人员需要使用无菌技术，确保操作的每一步都在符合标准的无菌条件下完成。

　　- 定期检查液氮罐的清洁与维护： 为了防止冻存过程中的交叉污染，定期检查液氮罐及其内部的存储环境十分重要。液氮罐应保持干净，内部容器、冻存管和冻存盒要定期清洁，以清除可能的细菌、病毒或其他污染物。

　　- 冷链管理： 细胞在冻存和运输过程中需要保持稳定的低温状态。为此，应使用高质量的液氮罐并监控液氮水平，避免细胞在存储期间因为温度变化而发生污染或退化。细胞的运输过程中要确保液氮充足，并且运输容器能够保持严密密封，避免外界的污染源进入。

　　细胞冻存前的质量控制

　　为进一步减少交叉感染的风险，在细胞冻存前进行严格的质量控制也是非常重要的。在细胞准备冷冻之前，应确保细胞培养环境和操作过程的清洁，特别是需要进行病毒检测的细胞，确保细胞在冻存前不携带任何潜在的病毒或细菌感染。常见的细胞病毒检测包括但不限于：我的病毒检测(Mycoplasma)，艾滋病毒检测，乙型肝炎和丙型肝炎病毒检测等。

　　除了检查细胞是否存在病原感染外，还应确保细胞的生长状态良好，避免冻存时细胞状态不佳而导致的冻存失败或后续培养过程中污染的风险。实验人员应定期进行细胞的健康检测，并在合适的时机进行冻存。

　　在操作过程中，合理的人员培训和严格的操作规程能有效降低交叉感染的风险。确保操作人员能够熟练掌握无菌操作技术，并且明确每一步骤的要求，都是防止细胞交叉感染不可忽视的重要环节。

　　通过采取上述方法，实验室在液氮罐中冻存不同细胞时，可以有效防止交叉感染的发生。