放入液氮罐中的组织如何复苏

时间:2024-02-29 13:17来源:原创作者:小编点击: 次

　　放入液氮罐中的组织复苏的步骤如下：

　　将冻存的细胞从液氮罐中取出，注意迅速且要保护好自己，防止低温伤害和可能的爆炸风险。一种推荐的操作方法是在地面或是桌面上铺两层干净吸水纸，将取出的冻存管放到吸水纸上，放平后液氮会快速从管缝隙中渗漏出来。

　　将冻存管放入37°C的水浴中进行融化，轻柔晃动以加速融化，直到小瓶中只剩下一小块冰，这个过程应控制在1分钟内完成。

　　用70%乙醇擦拭冻存管外部后，转移到无菌操作台中。在打开瓶盖前，用酒精灯火焰对瓶口进行消毒。

　　将预加热的新鲜完全培养基滴入冻存管中，然后用移液枪吸取瓶中液体至离心管中，加入适量浓度和体积的完全培养基，轻柔混合均匀。

　　进行细胞悬浮液的离心，速度和时间因细胞类型而异。离心后弃掉上清，加入新鲜完全培养基重悬细胞。

　　将细胞转移到适当的培养容器和推荐的培养环境中进行培养。在培养过程中，应尽量维持高密度以提高细胞存活率。

　　请注意，整个操作过程中必须保持无菌，以避免细胞污染。同时，所有步骤都应在合适的温度和环境下进行，以保证细胞的活力和复苏的成功率。

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