液态氮气,气化为氮气,的冷冻效果,在医疗科研上有广泛的应用。液氮冷冻培养菌种有很好的效果。其主要方法如下:
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液氮冷冻培养菌种的过程:欲用液态氮保存的茧种将其在适宜培养基适温培养至静IL期前期,生芽孢的菌应培养个形成成熟的芽孢为止:取试管或flnl生长好的培养物刚无菌生理盐水洗下细胞制成悬液.寸入·九闲凤竹叫’使之细胞分散均匀。再加等量的保护剂(甘油20%或10%DMSO),再允分混㈠。悬液制得后无菌地分装入巳灭菌容量为2ml的安瓿,每安瓿瓶分装0.5ml。然后进行冻结和保存‘使菌种经超低温保存后需使用时从液态氮气冰箱取出使用前需经解冻及复苏培养-解冻需采取快速加温,将盛有冻结样品的安瓿取出后立即放置38。C恒温水浴真-I,在具:1’摇动3~5min便可融化、复苏培养即将解冻后的细胞接种于该细菌适宜的斜面培养基上适温培养即可。
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