液氮罐中的菌种活化

液氮罐中的菌种(Bacterial species)活化是怎么回事？
　　菌（fungus)种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养， 逐级扩大培养是为了 得到纯而壮的培养物，即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。液氮罐一般可分为液氮贮存罐、液氮运输罐两种。 贮存罐主要用于室内液氮的静置贮存，不宜在工作状态下作远距离运输使用； 液氮罐为了满足运输的条件，作了专门的防震设计。其除可静置贮存外，还可在充装液氮状态下，作运输使用，但也应避免剧烈的碰撞和震动。液氮罐使用过程中要经常检查。可以用眼观测也可以用手触摸外壳，若发现外表挂霜，应停止使用；特别是颈管内壁附霜结冰时不宜用小刀去刮，以防颈管内壁受到破坏，造成真空不良，而是应将液氮取出，让其自然融化。菌种发酵又称酦酵有一般需要 2-3 代的复壮过程，因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同，所 以要活化,让菌种逐渐适应培养环境(environment) 要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。
　　目前国际(International)国内常用的 菌种保存方法包括(bāo kuò)： 定期移植法、 液体石蜡法、 沙土管法、 真空冷冻干燥法、 80℃ 冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。
　　对于不同的保存方式活化的方式也不同：
　　1 定期移植法的菌种复苏较简单，直接转接即可;
　　2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时，挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上， 生长繁殖（fán zhí）后，再重新转接一次;
　　3 沙土管法保存菌种(Bacterial species)在复苏时，在无菌(意思：没有活菌)条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适 宜的斜面培养(to cultivate)基上， 长出菌落后再转接一次。 或取沙土粒于适宜的液体(liquid)培养基中， 增殖培养后再转接斜面;
　　4 真空冷冻(freezing)干燥法保存菌种在复苏时先用 70%酒精棉花擦拭安瓿上部，将安瓿 管顶部烧热， 用无菌(意思：没有活菌)棉签沾冷水，在顶部擦一圈，顶部出现裂纹，用挫刀或镊 子颈部轻叩一下，敲下已开裂的安瓿管的顶端，用无菌水或培养液溶解菌块，使用(use)无菌吸管移入新鲜培养基上，进行适温培养;
　　5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种(Bacterial species)复苏时，从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管，应 立即放置 38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为 止，约需 50 秒-100 秒。开启安瓿管或塑料冻存管，将网站内容物移**适宜的培养基 上进行培养 6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似，从液氮罐(Liquid)中取出安瓿管或塑料冻存管，应立即放置在 38℃-40℃水浴中快速复苏并 适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止，一般约需 50 秒-100 秒。开启安瓿管或塑料冻存管，将内容物移**适宜的培养基上进行培养。
　　总结一下菌种活化需要以下几个步骤（procedure)：
　　**配置菌（fungus)种适宜生长(Grow)的培养基
　　第二将菌（fungus)种从保藏状态恢复到室温状态，比如将冷冻(freezing)的菌种解冻第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养，此步骤称为菌种复壮
　　第四步挑选培养基茁壮的菌落，挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养，重复此步骤（procedure) 2-3 次，从而得到生长(Grow)良好的菌落
　　经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的
　　有同学已经说的很专业(zhuān yè)了，我就给你说些简单实用的。不知道你出于何种目的要进行活化。 如果你是用冻存管保存的菌株进行活化， 取出 2 颗小珠放在适宜的固 体培养(to cultivate)基上，合上盖让小珠在平皿上滚动，适宜条件培养就可以了。长出一个菌 落，你再繁殖就可以了。如果你是冻干粉的菌种(Bacterial species)，准备适宜的液体培养基，少少一点点粉末接种就可以了，根据此菌种一般液体培养所需时间，大概在 36-48h， 你还可以在观察(Observed)到液体浑浊、试管底部有沉淀（precipitation）时(沉淀者也可能为原本死亡的细 菌)，取 100 微升液体涂抹(smear)在固体培养基上。 一般的话，复苏的菌种需要重复几次复壮。